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PCR電泳出現拖尾現象探究
日期：2025-06-07 03:43
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摘要：PCR電泳出現拖尾現象,就是彌散。其原因,主要從以下兩個方面考慮：
1、PCR產物自身原因：
往往由于酶量過多或酶的質量差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環次數過多,而造成PCR的非特異性產物 過多。
對策：①減少Taq酶的量,或調換另一來源的酶.②減少dNTP的濃度.③適當降低Mg2+濃度.④增加模板量,減少引物的用量 ,減少循環次數,提高退火溫度。
2、電泳體系的問題：
（1）電泳緩沖液TAE或者TBE的污染,建議更換緩沖液.（2）上樣時樣品漂了,建議增加上樣緩沖液的用量,以及小心加樣.（3）電壓太高.（4）適當把你的膠的濃度加大...
PCR電泳出現拖尾現象,就是彌散。其原因,主要從以下兩個方面考慮：
1、PCR產物自身原因：
往往由于酶量過多或酶的質量差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環次數過多,而造成PCR的非特異性產物 過多。
對策：①減少Taq酶的量,或調換另一來源的酶.②減少dNTP的濃度.③適當降低Mg2+濃度.④增加模板量,減少引物的用量 ,減少循環次數,提高退火溫度。
2、電泳體系的問題：
（1）電泳緩沖液TAE或者TBE的污染,建議更換緩沖液.（2）上樣時樣品漂了,建議增加上樣緩沖液的用量,以及小心加樣.（3）電壓太高.（4）適當把你的膠的濃度加大.（根據你的片斷大小而定）（5）觀察你的marker是否也存在拖尾現象,作為對照。
1、PCR產物自身原因：
往往由于酶量過多或酶的質量差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環次數過多,而造成PCR的非特異性產物 過多。
對策：①減少Taq酶的量,或調換另一來源的酶.②減少dNTP的濃度.③適當降低Mg2+濃度.④增加模板量,減少引物的用量 ,減少循環次數,提高退火溫度。
2、電泳體系的問題：
（1）電泳緩沖液TAE或者TBE的污染,建議更換緩沖液.（2）上樣時樣品漂了,建議增加上樣緩沖液的用量,以及小心加樣.（3）電壓太高.（4）適當把你的膠的濃度加大.（根據你的片斷大小而定）（5）觀察你的marker是否也存在拖尾現象,作為對照。